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療效研究

肉蓯蓉抗氧化作用及對(duì)超氧化物歧化酶活性的影響

日期:2012-12-26 15:34

謝繼紅 吳春福 鄒宇宏 劉雯 高集馥

大連醫(yī)藥科學(xué)研究所116013,沈陽(yáng)藥學(xué)院中藥藥理教研室11.0015)

提要肉蓉乙醇提取物在體外溫育體系中能顯著抑制大鼠腦、肝、心、}爭(zhēng)丸組織勻漿過(guò)氧化脂質(zhì)的生成,并呈現(xiàn)良好的量效關(guān)系。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中,該提取物100, 200mg/kg/ ,連續(xù)灌胃40天,僅對(duì)大鼠大腦皮層過(guò)}L化脂質(zhì)生成有顯著抑制作用,時(shí)其它組織無(wú)明顯影響,200mg/kg/日灌胃15天,時(shí)大鼠血漿超氧化物歧化酶活性有顯著增強(qiáng)作用。

關(guān)鍵詞肉;抗脂質(zhì)過(guò)氧化;超氧化物歧化酶

蓉屬補(bǔ)益強(qiáng)壯中藥。藥理研究表明肉歡蓉能增強(qiáng)動(dòng)物的免疫功能[1],調(diào)節(jié)下丘腦一垂體一性腺軸功能[2],對(duì)陽(yáng)虛動(dòng)物DNA合成有一定促進(jìn)作用[3]。近年來(lái)國(guó)內(nèi)許多學(xué)者研究了補(bǔ)益中藥的抗過(guò)氧化及抗衰老作用[4,5],然而在此方面有關(guān)肉蓉的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。為了探討肉蓉補(bǔ)益強(qiáng)壯機(jī)理,本文用體外和體內(nèi)方法研究了它對(duì)大鼠不同組織過(guò)氧化脂質(zhì)生成的作用,并研究了它對(duì)大鼠血漿超氧化物歧化酶活性的影響。

材料

動(dòng)物Sprague-Dawley種大鼠,雌雄兼用,體重180~200g,由沈陽(yáng)藥學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室提供。

藥品肉獲蓉(Cistanche deserticola  Y.C.Ma)購(gòu)自內(nèi)蒙古赤峰市藥材公司,生藥由沈陽(yáng)藥學(xué)院植物教研室孫啟時(shí)副教授鑒定。取生藥粉碎后,用70%乙醇提取,回收乙醇,干燥后得樣品。硫代巴比妥酸為上海試劑二廠產(chǎn)品,四乙氧基丙烷為瑞士Fluka產(chǎn)品,超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒購(gòu)自海軍總醫(yī)院分子生物學(xué)研究室。

方法與結(jié)果

體外肉眾蓉對(duì)大鼠不同組織過(guò)妞化脂質(zhì)生成的影響取大鼠斷頭處死,迅速取出心、腦、肝、腎、辜丸組織,分別制成5%組織勻漿生理鹽水液。每只試管中加入不同濃度的肉蓉液0.1m1,與組織勻漿共同溫育1.5小時(shí)。參照Riely的方法[67,用硫代巴比妥酸顯色,532nm處測(cè)OD值。以四乙氧基丙烷為標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算每克組織過(guò)氧化脂質(zhì)的生成量。結(jié)果表明,肉歡蓉對(duì)體外溫育條件下不同組織勻漿過(guò)氧化脂質(zhì)的生成均有顯著的抑制作用,且隨藥物濃度增加,過(guò)氧化脂質(zhì)生成量減少,呈現(xiàn)良好的量效關(guān)系(1)

體內(nèi)肉眾蓉對(duì)大鼠不同組織過(guò)妞化脂質(zhì)生成的取大鼠42只,雌雄各半,隨機(jī)分為3組,每組14。給藥組分別灌胃肉蓉提取物50, 100mg/kg,每日二次;對(duì)照組灌胃等容量生理鹽水。

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于給藥15天后,各組取一半動(dòng)物,參照R iely的方法[6]測(cè)定大腦皮層、心、肝、腎組織中過(guò)氧化脂質(zhì)含量。余下動(dòng)物繼續(xù)給藥,40天后同前處理,測(cè)定過(guò)氧化脂質(zhì)含量(2)

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由表2可見(jiàn),連續(xù)灌胃給予肉15天,對(duì)大鼠各組織過(guò)氧化脂質(zhì)生成沒(méi)有顯著影響;給藥40天,對(duì)大鼠大腦皮層過(guò)氧化脂質(zhì)生成呈顯著抑制作用,而對(duì)其它組織沒(méi)有顯著影響。

對(duì)大鼠血槳SOD活性的影響取大鼠21只,雌雄兼用,隨機(jī)分為3組,每組7只。給藥組分別灌胃肉蓉提取物50, 100mg/kg,每日二次,對(duì)照組灌胃等容量生理鹽水,連續(xù)15天。停藥后第二天,將大鼠斷尾采血0.7m1,肝素抗凝,1500rpm離心6min,制備血漿,按亞硝酸法[7]測(cè)定SOD活性。結(jié)果以亞硝酸單位/ml表示SOD活性,生理鹽水組為77.08.6,肉100mg/kg/日組為80.911.6 , 200mg/kg/日組為87.45.7。結(jié)果表明肉200mg/kg/日組可顯著增強(qiáng)大鼠血漿中SOD活性((P<0.05)。

 討論

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,肉蓉乙醇提取物在體外反應(yīng)體系中抗脂質(zhì)過(guò)氧化作用的最小有效濃度為60µg/ml,隨藥物濃度增加藥效相應(yīng)增強(qiáng);體內(nèi)給藥40天顯著抑制大鼠大腦皮層過(guò)氧化脂質(zhì)的生成。文獻(xiàn)報(bào)道[8],肉蓉中的成分之一京尼平酸(genipo-sidic acid)是一種非常強(qiáng)的抗氧劑,肉類是一族含有兒茶酚結(jié)構(gòu)的化合物[9,10],已們也極易被氧化,提示肉蓉自身具有抗氧化作用。本實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)肉蓉乙醇提取物對(duì)大鼠血漿SOD活性有促進(jìn)作用,表明它對(duì)機(jī)體自由基防御酶也有激活作用,另一方面起到抑制脂質(zhì)過(guò)氧化,防止組織損傷的作用。

一般認(rèn)為,具有清除自由基、抑制脂質(zhì)過(guò)氧化的藥物,在一定程度上可以防治疾病、延緩衰老。

本研究結(jié)果為肉蓉的補(bǔ)益強(qiáng)壯作用提供了一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

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